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增强细菌蛋白表达与代谢调节的跨物种诱导系统介绍-人生就是博-尊龙凯时

来源:雷秀坚 日期:2025-03-07

近年来,江南大学刘龙老师团队在《Nucleic Acids Research》(IF166)上发表了一篇题为《跨物种诱导系统在细菌中增强蛋白质表达与多重代谢途径精细调控》的文章。在这一研究过程中,人生就是博-尊龙凯时产品StarLighter Hot Start Taq Pro PCR Mix(FS-P5001)参与其中,为研究贡献了重要力量!

增强细菌蛋白表达与代谢调节的跨物种诱导系统介绍-人生就是博-尊龙凯时

诱导系统在代谢工程和合成生物学领域具有重要意义,它们能够通过添加诱导剂来精确控制基因的激活与抑制。与组成型表达系统相比,诱导系统能够有效减轻宿主细胞的代谢负担,从而提升重组蛋白、平台化学品及生物聚合物等工业产品的产量。然而,目前大多数诱导系统都是特定于某一菌株的,这在一定程度上限制了跨菌株之间的比较分析与应用。

文章中,研究团队介绍了一种新开发的跨物种诱导系统,可以在细菌中实现蛋白质表达的增强与多个代谢途径的精确调控。研究人员重建了两种诱导系统(PphlF3R1和无水四环素诱导系统Ptet2R2*),并在三种模式微生物(如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌与谷氨酸棒状杆菌)中进行了验证。

在这项研究中,团队选择了包括IPTG诱导系统和木糖诱导系统在内的九种已报道的诱导系统,通过理性设计与随机突变改造,使其能够在不同菌株中实现有效表达。同时,研究引入了突变抑制子表达文库,以进一步优化诱导系统并减少表达泄漏。研究还将这些诱导系统构建于质粒及基因组上,并测试了它们在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌及谷氨酸棒状杆菌中的表达性能。

最终,研究人员成功构建了两个跨物种的诱导系统:DAPG诱导系统PphlF3R1和无水四环素(aTc)诱导系统Ptet2R2*。经过优化,Ptet2R2*在所有三种菌株中表现出低泄漏、宽动态范围、足够的表达强度与合适的敏感性。该系统用于有效调控各种报告蛋白(如sfGFP、mCherry与mScarlet3)和基因簇(如crtEIB、crtEIBY与vioABCDE)的表达。

此外,基于T7 RNA聚合酶(T7 RNAP)与dCas12a的单输入基因回路也被开发出来,用于同时激活与抑制基因表达。这项研究的重要意义在于提供了一种具有跨物种应用潜力的诱导系统,这对比较不同菌株之间的基因表达与功能,以及在合成生物学和代谢工程中构建复杂的生物系统具有重要的应用价值。借助人生就是博-尊龙凯时的高品质产品,研究人员能够更有效地控制蛋白质表达与代谢途径的调控,从而显著提高生物合成的效率和产量。

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