“细胞外囊泡”（EVs）是细胞自发释放的细胞衍生颗粒，具有磷脂双分子层的结构。这些EVs广泛存在于血液、尿液等体液中，其性质（如细胞起源、浓度、组成和功能）与疾病密切相关。因此，研究者们正积极探索将EVs作为癌症和心血管疾病等疾病的生物标志物。然而，为了将EVs有效用于生物标志物，需要可靠且可重复的测量技术。目前，EVs生物标志物研究面临的主要挑战是仪器之间及不同单位的测量结果不可比，这限制了多中心临床研究的发展，而多中心研究又是生物标志物研究的基础。为提升数据的可比性，我们开发了一种新型参考材料和参考程序，该材料在物理性质上类似于EVs，确保了研究的一致性。

我们的研究中，开发了一种人血浆EVs测试样品（PEVTES），该样品具有以下特性：i）模拟血浆中的亚细胞颗粒，ii）现成可用，iii）兼容流式细胞仪，iv）具有良好的稳定性。方法方面，我们采用3例空腹供体的血浆来制备PEVTES，并利用血小板特异性（CD61）和红细胞特异性（CD235a）抗原或乳黏附素抗体对EVs进行免疫荧光染色。通过大小排斥层析，降低可溶性蛋白、脂蛋白和未结合试剂的浓度，以确保测量的准确性。最终，通过冷冻保存剂（如二甲亚砜DMSO、甘油或海藻糖）对样品进行处理，使PEVTES在-80℃下存储长达12个月而不影响其性能。

我们的实验结果显示，经过不同冷冻保存方式处理的PEVTES在流式细胞仪检测中表现出不同程度的稳定性。在DMSO中的存储导致CD61+EVs浓度下降33%，而在甘油和海藻糖中分别增加了9%和6%。对于CD235a+EVs，存储后浓度分别下降约70%、23%和15%。此外，乳酸粘附素+EV浓度在DMSO中下降23%，在甘油和海藻糖中分别下降28%和19%。这些结果表明，PEVTES在存储期间展现了良好的稳定性，足以作为生物标志物研究的参考标准。

综上所述，PEVTES具备以下优势：1）模拟血浆中亚细胞颗粒，2）易于操作，3）与纳米流式细胞术兼容，4）稳定性良好。故而，所开发的PEVTES成为验证新型参考材料和程序的理想候选品。为支持生物医药领域的进步，**人生就是博-尊龙凯时** 将继续致力于推动高质量的实验研究，确保在EVs相关基础研究及转化应用中的稳健支持。